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定量分析法是什么原理,定量分析有哪几种方法

时间:2022-12-01 07:26来源:互联网整理    作者:南宁山鸡

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定量分析法是什么原理,定量分析有哪几种方法

定量分析法是什么原理定量分析有哪几种方法

No.1 蛋白质定量分析

蛋白质的定量分析是生物化学和其他生命学科最常涉及的分析内容,是临床上诊断疾病及检查康复情况的重要指标,也是许多生物制品,药物、食品质量检测的重要指标。在生化实验中,对样品中的蛋白质进行准确可靠的定量分析,则是经常进行的一项非常重要的工作。

蛋白质种类很多,结构不均一,分子量又相差很大,这样就给建立一个理想而又通用的蛋白质定量分析的方法带来了许多具体的困难。目前测定蛋白质含量的方法有很多种,根据测量方法不同可分为下列几种。

◆ 物理:紫外分光光度法

◆ 化学:凯氏定氮法、Folin-酚试剂法(Lowry法)、BCA法

◆ 染色或荧光:考马斯亮蓝法(Bradford法)、银染法、荧光染料

No.2 常见四种方法

蛋白浓度测定的方法有很多,但每种方法都有其特点和局限性,因而需要在了解各种方法的基础上根据不同情况选用恰当的方法,以满足不同的要求。例如凯氏定氮法结果最精确,但操作复杂,用于大批量样品的测试则不太合适;Lowry法精确度较高,但是比较费时,且每步的时间要求相对严格;Bradford法灵敏简便,但易受去垢剂的影响;BCA法以其试剂稳定,抗干扰能力强,结果稳定,灵敏度高而受欢迎。

在蛋白浓度测定中,以下面四种方法最为常见:

下面主要对lowry法,braford法,BCA法,紫外分光光度法,这几种常用方法进行介绍:

一:lowry法

其原理是蛋白中含有酚基的络氨酸,可与酚试剂中的磷钼钨酸作用产生蓝色化合物,其最大吸收波长为750nm,蛋白含量与750nm的吸光度成正比。

该方法的特点是灵敏度高,反应约在15分钟有最大显色,并最少可稳定几个小时,不足之处是实验过程中需精准控制试剂加入时间,干扰因素较多(如上表)。

二:BCA法

碱性条件下,Cu2+被蛋白还原成Cu+,与BCA试剂形成蓝紫色的络合物,在562nm处具有最大吸收峰,在一定范围内,蛋白含量与562nm的吸光度成正比。

该方法灵敏度高,操作简单,试剂及其形成的颜色复合物稳定,受干扰物影响较少,其优点是不受去垢剂的影响,可兼容样品中高达5%的SDS,5%的TritonX-100,5%的Tween20,60,80。但会受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响。

三:Bradford法

考马斯亮蓝G250,在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质—色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。在一定范围内,其光吸收值与蛋白质含量成正比。

Bradford法灵敏度高,可检测到微量蛋白,操作简便、快速,重复性好,但常用的试剂会对结果有不同程度的干扰,其中Tris、巯基乙醇、蔗糖、甘油、EDTA及少量去垢剂有较小影响,而1%SDS、1%TritonX-100及1%Hemosol的干扰严重。且显色结果受时间和温度的影响较大,须注意保证样品与标准的测定控制在同一条件下进行。

四:分光光度计法

受蛋白质中络氨酸、色氨酸残基影响,蛋白质溶液在280nm附近有强烈的吸收。若蛋白溶液中杂有的核酸,对测定结果会有较大影响,而核酸最大吸收峰在260nm。所以同时测定280nm及260nm两种波长的吸光度,通过计算可得较为正确的蛋白含量。

该方法测定不需要任何试剂,操作简单,且样品可回收。但在使用公式计算时也应该注意各种蛋白和各种核酸在280nm及260nm处的吸光值也不尽相同,故计算结果有误差。

No.3 总结

综上所述,这几种方法都可用于蛋白质的定量分析,但是每种方法的优缺点各不相同,还是需要结合实验的实际情况选择最合适的方法。

定量分析方法有哪几种

360问答色谱分析常用的有归一化法,外标法,内标法等三种定量方法。当样品各组分不能全部出峰或在多种组分中只需要定量其中几个组分时可选用内标法。

定量分析法有什么

定量分析法是以企业财务报表为主要数据来源,按照某种数理方式进行加工整理,得出企业信用结果。

  定量研究一般是为了对特定研究对象的总体得出统计结果而进行的。定性研究具有探索性、诊断性和预测性等特点,它并不追求精确的结论,而只是了解问题之所在,摸清情况,得出感性认识。定性研究的主要方法包括: 与几个人面谈的小组访问,要求详细回答的深度访问,以及各种投影技术等。在定量研究中,信息都是用某种数字来表示的。在对这些数字进行处理、分析时,首先要明确这些信息资料是依据何种尺度进行测定、加工的,史蒂文斯(S. S. Stevens)将尺度分为四种类型,即名义尺度、顺序尺度、间距尺度和比例尺度。

  定量研究的四种测定尺度及特征

  名义尺度所使用的数值,用于表现它是否属于同一个人或物。

  顺序尺度所使用的数值的大小,是与研究对象的特定顺序相对应的。例如,给社会阶层中的上上层、中上层、中层、中下层、下下层等分别标为“5、4、3、2、1”或者“3、2.5、2、1.5、1”就属于这一类。只是其中表示上上层的5与表示中上层的4的差距,和表示中上层的4与表示中层的3的差距, 并不一定是相等的。5、4、3 等是任意加上去的符号,如果记为 100、50、10 也无妨。

  间距尺度所使用的数值,不仅表示测定对象所具有的量的多少,还表示它们大小的程度即间隔的大小。不过,这种尺度中的原点可以是任意设定的,但并不意味着该事物的量为“无”。例如,O°C 为绝对温度 273°K,华氏32°F。

  名义尺度和顺序尺度的数值不能进行加减乘除,但间距尺度的数值是可以进行加减运算的。然而,由于原点是任意设定的,所以不能进行乘除运算。例如,5℃和 10℃之间的差,可以说与15℃和20℃之间的差是相同的, 都是5°C。但不能说 20℃就是比5℃高4倍的温度。

  比例尺度的意义是绝对的,即它有着含义为“无”量的原点0。长度、重量、时间等都是比例尺度测定的范围。比例尺度测定值的差和比都是可以比较的。例如:5分钟与10 分钟之间的差和10分钟与15分钟之间的差都是5 分钟,10 分钟是2分钟的5倍。比例尺度可以进行加减乘除运算。

定量分析法是什么分析化学中

面点面食加工应用匹配什么水质最好?

首发|杜德春

水质的化学指标

利用化学反应、生化反应及物化反应的原理测定水质指标,总称为化学技标。

由于化学成分的复杂性,通常选用恰当的化学特性来进行检查或作定性、定量分析。

主要的化学指标有碱度、硬度、pH 值、氯离子等。

在馒头生产中经常测定的物化指标主要是水的温度、pH值、硬度、嗅与味其他方面的应用较少,如微量分析只有在发生食物中毒等少数情况下才进行。

水质与面团质量的关系

水质对面团的发酵和产品的质量影响很大。在水质的诸多指标中,水的温度、pH值及硬度对面团的影响最大。

下面分别叙述之。

硬度与面团质量的关系

硬度是将水中溶解的钙、镁离子的量换算成相应的氧化钙(碳酸钙)的量为水质标准的重要指标之一。

水质硬度的表达方式(单位)有很多。我国水硬度的标准与德国硬度(dH)一致:

100毫升水中含有1毫克氧化钙(CaO)1度(即1°dH=10毫克氧化钙/千克水)。

氧化镁的量应换算成氧化钙,换算么式如下:1毫克氧化钙=0.74毫克氧化镁。水质硬度分类见杜德春老师水质表原创。

高度硬水

水的硬度对面团的影响较大。水中的矿物质一方面可提供酵母营养,另一方面可增强面团的韧性,但矿物质过量的硬水,会导致面筋韧性太强,反而会抑制发酵产气,与添加过多的面团改良剂现象相似。

若水的硬度过大,可采用煮沸去除一部分钙离子,或者延长发酵时间的方法来弥补其对面团的影响。如水的硬度过小,可采用添加矿物盐的方法来补充金居离子。

水的pH值与面团质量的关系

pH值代表的是酸碱度,是水质的一项重要指标。面团的pH值与馒头的质量有十分密切的关系。

pH值较低,酸性条件下会导致面筋蛋白质和淀粉的分解,从而导致面团加工性能降低;pH值过高则不利于面团的发酵。

水pH值的大小对馒头生产也影响较大,pH值适中,和面后面团不需特意调节p能达到生产要求,给生产带来极大的方便。

为节省库存开支,工厂生产一般是用新面粉为原料进行产品的生产,而一般的新面pH值不低于6.0,因而控制水的pH值也能较好地调节面团的pH值,优化生产工艺。水的pH值为6.5时,面点面食的质量最优,这与工艺研究中面团的pH值对面点质量的影响相对应。实际应用中,不同的面粉对水的pH值有不同的要求,故而,行之有效的方法是控制好面团的pH值。

水温与面团质量的关系

水的温度与面团的发酵息息相关,是不可忽略的重要因素。我国地域广阔。各地的温差很大,这也导致了水温的不同,即便是同一地区,由于四季的更替。

水的温度亦有很大的差别。因而,在调制面团时,我们要考虑这些因素。考虑到酵母的最佳发酵温度在30℃左右,因此,一般情况下,夏天和面时,水不需加热就可直接加入进行和面;春秋季节稍稍加温到30℃就可;冬天,水最好是热到40算即可。

但无论何时,建议水温最好不要超过50℃,以免造成酵母、乳酸菌醋酸菌丁酸菌益生菌的死亡。

水在面点面食中的作用

①蛋白质吸水、胀润形成面筋网络,构成制品的骨架;淀粉吸水膨胀,加热后糊化,有利于人体的消化吸收。

②溶解各种干性原辅料,使各种原辅料充分混合,成为均匀一体的面团。

③调节和控制面团的黏稠度和湿度,有利于做形。

④通过调节水温来控制面团的温度。

⑤帮助生化反应,一切生物活动均在有水的条件下进行,生化反应包括配母都需要有一定量的水作为反应介质及运载工具具,尤其是酶。

水可促使酵母的生长及酶的水解作用。

⑥水为传热介质,在熟制过程热量能够顺利传递。

世卫组织或国标GB规定的好水标准:(广西巴马长寿村小分子水与榆林桃花水)

1.不含有害物质

2。PH值呈弱碱性

3.带有负电位

4.小分子团小

5.微量元素含量适中(富含微量元素矿物质18-28种)

6.含氧量高

翻译水质特点有以下特点:

1.不含有害的物质,水中已去除氯味,以及0.01微米以上的细菌

2.含有大量离子状态的钙等微量元素

3.由5-6个小分团组成,渗透力强,能促进新陈代谢

4.带300毫伏以上的负电位,能清除多余的自由基

5.含氧量高每升5毫克左右

6.PH值呈弱碱性能维持身体酸碱平衡。

水质品质对焙烤食品与面点面食食品系统影响有哪些?

一:六项好水对于产品的防腐与抗氧化具有非常大的意义~用没有任何微量元素矿物质的纯净水,意味着产品提前氧化与霉变(杜德春焙烤工艺);

二:用纯净水或者只有3-4项水质而言,吸水率与麦稻香严重制约其风味挥发来源;

三:纯净水意味着微量元素矿物质为零,对于人体而言,是有害的;

四:水质的匹配,与小麦面粉同等重要;只不过 食品法不严格;食药局执法不严谨不作为(SC),导致了水品、水机、水质的混乱不堪。

定量分析法是什么意思

定量就是可以数的东西,定性就是数不了,只能从性质分析的。举例:法国葡萄酒,其所称年份应是葡萄采摘的年份,而不是生产年份.定性分析就是能品味出里面有什么内容,什么成分.而定量则是要告知有多少,百分比为多少.比如说分辨某个液体是葡萄酒还是黄酒,应该属于定性分析;而分辨它有多少糖分,多少酒精,多少芳香醇,等等,(有少量甲醇).定量分析的难度远远大于定性分析.

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